抗体选择压作用下H9N2亚型禽流感病毒HA基因的变异

【目的】了解H9N2亚型禽流感病毒(AIV)在抗体选择压作用下的遗传变异。【方法】将制备疫苗用的LG1株H9N2亚型AIV分别接种含有母源抗体鸡胚(A组)和不含有母源抗体的SPF鸡胚(B组),并连续传代。其中A组再分为4个独立的传代系列A1-4,B组再分为2个独立传代系列B1-2。在每个传代系列,分别对第10,20,30,40,50代病毒的HA基因进行扩增克隆测序,并与原始病毒的序列比较。【结果】LG1株H9N2在没有抗体的鸡胚的传代过程中,仅发生少数碱基的不稳定随机变异,且多为无义突变。在经测序的2个传代序列的10个不同代次病毒,共出现了29个位点变异,有义突变(NS)与无义突变(S)比值NS/S为1.42。但在有抗体的鸡胚的传代过程中,发生了多个呈现稳定遗传的有义突变。在经测序的4个传代序列的20个不同代次病毒,共出现了45个位点变异,有义突变(NS)与无义突变(S)比值NS/S为3.46。【结论】在鸡胚传代过程中母源抗体提供的免疫选择压确实能影响H9N2的HA基因的变异。同时表明,带有母源抗体的鸡胚是实验室条件下研究免疫选择压对病毒抗原性变异影响的一种有效的实验模型。