山葡萄SRAP技术体系的建立及其在品种鉴定中的应用

以6个不同的山葡萄品种为材料,对山葡萄SRAP分子标记技术体系进行优化,探讨SRAP标记在山葡萄品种鉴定中的可行性。结果表明:SRAP扩增程序为94℃预变性5 min;前5个循环,94℃变性45 s,35℃退火45 s,72℃延伸90 s;后35个循环,94℃变性45 s,50℃退火45 s,72℃延伸90 s;最后72℃延伸7min。反应体系:25μL总反应体系中含模板DNA 20 ng,dNTP 1.0μL,上下游引物各1μL,rTaq酶0.2μL,10倍Buffer1.0μL,其余用灭菌的ddH2O补充。应用筛选出的16对引物对6个山葡萄品种进行扩增,共扩增出96条条带,其中多态性带占67.71%。每个品种都能找出其特有条带,最少用2对引物就可鉴别6个山葡萄品种。