埃博拉病毒检测与分型Real-time PCR方法的建立

被引:16
作者
盖微微 [1 ,2 ,3 ]
郑学星 [2 ,3 ]
薛向红 [2 ,3 ]
高玉伟 [2 ,3 ]
赵永坤 [2 ,3 ]
王铁成 [2 ,3 ]
王化磊 [2 ,3 ]
黄耕 [2 ,3 ]
冯娜 [2 ,3 ]
杨松涛 [2 ,3 ]
夏咸柱 [2 ,3 ]
机构
[1] 吉林农业大学动物科技学院
[2] 军事医学科学院军事兽医研究所
[3] 吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室
关键词
埃博拉病毒; Real-timePCR; TaqMan探针; 检测方法;
D O I
10.13350/j.cjpb.2013.03.001
中图分类号
R373.9 [其他病毒];
学科分类号
100103 ; 100705 ;
摘要
目的建立一种致死性埃博拉病毒(EBOV)的快速检测与分型方法。方法根据苏丹型和扎伊尔型埃博拉病毒糖蛋白基因的保守区序列,设计一对通用引物及特异性TaqMan探针。通过条件优化,以10倍系列稀释质粒pblue-SG,pblue-ZG为标准品,进行Real-time PCR扩增,制作标准曲线,并进行重复性、准确性检验及特异性检测。结果 Real-time PCR检测苏丹型和扎伊尔型埃博拉病毒标准曲线相关系数均大于0.99,灵敏度可达1.0×101拷贝,高于常规PCR方法的106~107;7种其他对照烈性病病原体检测均呈阴性。结论用建立的Real-time PCR方法检测埃博拉病毒快速、灵敏、特异,重复性好,为埃博拉出血热的快速确诊奠定了基础。
引用
收藏
页码:208 / 211+216 +216
页数:5
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