乌司他丁通过干预p38MAPK/ERK信号通路减轻脓毒症性肺损伤

目的探讨乌司他丁（ulinastatin,UTI）对脓毒症性急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory distress syndrome,ARDS）大鼠的肺保护作用及可能机制。方法 56只Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组、模型（LPS 6、12、24 h）组、乌司他丁（UTI 6、12、24 h）组,每组8只。采用腹腔注射细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS,10 mg·kg-1)的方法制备大鼠ARDS模型,乌司他丁组在左侧腹腔注射LPS后1 h后,在右侧腹腔注射乌司他丁20 000 U·kg-1,对照组、注射同等剂量的生理盐水,各组大鼠在不同时间点留取肺组织及血浆标本。计算肺组织湿/干质量（W/D）比值;光镜下观察肺组织病理改变;用ELISA法检测各组血浆中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)、肺表面活性物质A(（surfactant protein A,SPA）含量,检测各组肺匀浆中丙二醛（malondialdehyde,MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide Dismutase,SOD）和一氧化氮（nitric oxide,NO）含量;免疫组化法检测p38丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase,p38MAPK）、细胞外信号调节蛋白激酶（extracellular-signal regulated protein kinase,ERK）蛋白表达情况;Western blot法检测肺组织中磷酸化p38MAPK（p-p38MAPK）及磷酸化ERK（p-ERK）蛋白表达的变化。结果光镜下观察对照组肺组织结构完整,肺泡腔清晰;LPS组肺泡壁增厚,渗出明显,肺组织出现损伤性变化,以12h组变化最明显;UTI组各组病理改变较LPS组明显减轻。与对照组比较,LPS组W/D比值、血浆TNF-α、IL-18含量,肺匀浆MDA、NO含量均明显升高（P<0.05）,而肺匀浆SOD含量明显降低;与LPS组比较,UTI各组肺组织W/D比值、血浆TNF-α、IL-18含量,肺匀浆MDA含量均明显降低,而肺匀浆SOD含量明显增高,差异有统计学意义;免疫组化结果显示:与对照组比较,LPS组p38MAPK、ERK蛋白在胞质和胞核表达均明显增加,而UTI组较LPS组表达均明显减少;Western blot检测结果显示:与对照组比较,LPS组肺组织p-p38MAPK/ERK蛋白表达均明显增高,而UTI干预组蛋白表达均明显受抑制。结论乌司他丁通过干预p38MAPK/ERK信号通路、抗氧化作用而减轻炎症反应,发挥对LPS致脓毒性大鼠ARDS的保护作用。