目的建立高效液相色谱法,改进注射用水溶性维生素中维生素B12的含量测定方法。方法色谱柱为COSMOSIL C18(250mm×4.6mm×5μm),流动相为甲醇-水(25∶75);流速为1.2ml/min;柱温为30℃,检测波长为550nm。结果维生素B12在每毫升含0.25~0.75μg的浓度范围内线性关系良好,r=0.9998(n=5)。平均回收率为99.2%,相对标准偏差值(RSD)为0.8%(n=9)。结论本方法简便、准确,不受其他成分的干扰,可用于测定注射用水溶性维生素中维生素B12的含量。