大鼠肺间质巨噬细胞CCK受体的结合特性

被引:4
作者
高维娟
许顺江
李淑瑾
丛斌
凌亦凌
姚玉霞
杨世方
孟爱红
谷振勇
机构
[1] 河北医科大学病理生理学教研室,河北医科大学病理生理学教研室,河北医科大学病理生理学教研室,河北医科大学病理生理学教研室,河北医科大学病理生理学教研室,河北医科大学病理生理学教研室,河北医科大学病理生理学教研室,河北医科大学病理生理学教研室,河北医科大学病理生理学教研室河北石家庄,河北石家庄,河北石家庄,河北石家庄,河北石家庄,河北石家庄,河北石家庄,河北石家庄,河北石家庄
关键词
胆囊收缩素; 受体; 肺间质巨噬细胞; 脂多糖; 放射配基结合实验;
D O I
暂无
中图分类号
R363 [病理生理学];
学科分类号
100104 ;
摘要
目的:观察大鼠肺间质巨噬细胞(PIMs)胆囊收缩素(CCK)受体的表达亚型和结合特性。方法:用酶消化法结合肺泡耗竭灌洗和肺循环灌洗技术分离纯化大鼠PIMs,超速离心法提取细胞膜,与[3H]标记的硫酸化CCK-8([3H]-CCK-8S)进行放射配基结合实验,用非标记的CCK-8S、CCK-A受体(CCK-AR)特异性拮抗剂CR1409及CCK-B受体(CCK-BR)特异性拮抗剂CR2945进行竞争抑制实验,观察配体受体结合的特异性及CCK受体表达亚型,观察孵育时间和温度对特异性结合的影响。结果:正常大鼠PIMs未能检出特异性结合,静脉注射脂多糖(LPS)48h出现特异性结合,且对孵育时间与温度有依赖性。经Scatchard分析,平衡解离常数(Kd)值为:(0.68±0.28)nmol·L-1,最大结合容量(Bmax)值为(32.50±2.70)pmol·g-1蛋白。通过竞争抑制实验,[3H]-CCK-8S与膜的结合可被CCK-8S、CR1409、CR2945所抑制,其IC50值分别为:(3.20±1.13)nmol·L-1,(0.19±0.06)μmol·L-1和(2.30±0.80)nmol·L-1。结论:大鼠PIMs存在CCK-A和CCK-B两种受体亚型,为CCK对生理及病理条件下巨噬细胞发挥效应提供了直接的结构依据。
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