子宫内膜癌细胞中[12Asp]K-ras4B基因对雌激素受体亚型转录活性的影响

被引:3
作者
桂黎明
魏丽惠
徐明旭
王建六
钟英成
李小平
屠铮
孙蓬明
马大龙
机构
[1] 北京大学人民医院妇科,北京大学人民医院妇科,北京大学人民医院人类疾病遗传研究中心,北京大学人民医院妇科,北京大学人民医院人类疾病遗传研究中心,北京大学人民医院妇科,北京大学人民医院妇科,北京大学人民医院妇科,北京大学人民医院人类疾病遗传研究中心,,,,,,,,
关键词
子宫内膜肿瘤; 肿瘤细胞,培养的; 受体,雌激素; 转录,遗传; 基因,ras;
D O I
暂无
中图分类号
R737.33 [子宫肿瘤];
学科分类号
摘要
目的 探讨人子宫内膜癌细胞株HEC 1A细胞ras基因第 12密码子中突变型 (即[12 Asp]K ras4B基因 )对雌激素受体 (ER)及其亚型α、β蛋白的表达和转录活性的影响。 方法  ( 1)用蛋白免疫印迹法检测 [12 Asp]K ras4B基因对ERα、ERβ蛋白表达的影响。 ( 2 )构建含荧光素酶报告基因和ER反应元件 (ERE)的真核表达质粒 pGL3 ERE luciferase ,与表达绿色荧光蛋白的 pEGFP N1质粒共同转染鼠成纤维细胞株NIH3T3细胞及HEC 1A细胞 ,观察雌二醇调节 [12 Asp]K ras4B基因对ER的转录活性 ;分别转染含有全长野生型ERαcDNA的 pSV5 HER0和抑制raf基因的 pCMV rafS6 2 1A ,探讨 [12 Asp]K ras4B/raf信号通路对ER转录活性的调节作用。 结果  ( 1)NIH3T3细胞转染 pcDI [12 Asp]K ras4B质粒与转染空载体 pcDI质粒比较 ,ERα表达水平增加 3 6倍 (分别为 97± 2 5和 349± 6 7,P <0 0 1) ,ERβ增加 1 9倍 (分别为 12 8± 37和 2 4 9± 30 ,P <0 0 5 )。 ( 2 ) pCMV rafS6 2 1A质粒分别转染到含 pcDI [12 Asp]K ras4B质粒的NIH3T3细胞和HEC 1A细胞 ,转染前、后NIH3T3细胞ERα蛋白表达水平分别为 72 4± 4 5和 310± 4 6 (P <0 0 5 ) ,ERβ蛋白表达水平分别为 4 93± 2 0和2 84± 2 0 (P <0 0 1) ;转染前、后HEC 1A细胞ER
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共 2 条
  • [1] 突变型[12Asp]K-ras4B基因的致瘤作用及其机制的探讨
    桂黎明
    魏丽惠
    张颖妹
    王建六
    王应
    陈英
    马大龙
    [J]. 癌症, 2002, (01) : 33 - 38
  • [2] Ras protein signalling. Olson MF, Marais R. Seminars in Immunology . 2000