产气荚膜梭菌α-β2-β1融合基因的构建及表达

被引:6
作者
韩学波 [1 ]
许崇波 [2 ]
曾瑾 [1 ]
王玉炯 [1 ]
机构
[1] 宁夏大学生命科学学院
[2] 大连大学生物工程学院
关键词
产气荚膜梭菌; 毒素; 融合基因;
D O I
10.13200/j.cjb.2006.05.19.hanxb.005
中图分类号
R378 [病原细菌];
学科分类号
100103 ; 100705 ;
摘要
目的构建产气荚膜梭菌α-β2-β1融合蛋白基因表达载体,并对表达产物进行鉴定。方法利用PCR技术,从含α毒素基因的质粒pXCPA02中扩增出α毒素基因,经NcoⅠ酶切,回收0·95kb的α基因片段,再与经NcoⅠ酶切并含融合基因β1-β2的质粒pXETB1B2连接,获得重组质粒pXETAB2B1,经NcoⅠ、BamHⅠ和EcoRⅠ酶切鉴定,并对其表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果重组质粒pXETAB2B1含有α-β2-β1融合基因。表达产物相对分子质量约为95000,并可被特异性抗体识别。结论已获得高效表达α-β2-β1的重组菌株。
引用
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