猪微卫星标记多重PCR扩增组合

被引:6
作者
郭晓令
徐宁迎
LOOFT Christian
REINSCH Norbert
KAL M Ernst
机构
[1] 浙江大学动物科学学院,浙江大学动物科学学院,德国基尔大学畜牧兽医所,德国基尔大学畜牧兽医所,德国基尔大学畜牧兽医所杭州德国基尔大学畜牧兽医所,基尔,杭州,基尔,基尔,基尔
关键词
猪; 微卫星; 多重PCR;
D O I
10.16288/j.yczz.2004.01.008
中图分类号
Q789 [基因工程的应用];
学科分类号
摘要
采用多重PCR的方法,以快速扩增微卫星标记和节约试剂为目标,对其反应条件进行优化后,获得了46个扩增效果理想的微卫星标记多重PCR组合,其中30个为二重PCR,16个为三重PCR。实验结果表明,这些多重PCP反应的引物浓度为0.06~0.3μmol/L,Mg2+的浓度变化范围为1.5~3.0mmol/L,采用的PCR缓冲液的倍数为1.0、1.2、1.4或1.6,每个PCR反应聚合酶的用量在0.2和0.4U之间,退火温度及反应循环数分别为52~60℃和32~50℃。所有多重PCR进一步合并为17个可在ABI337测序仪上进行电泳的组合。
引用
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