短柄ISSR-PCR反应体系的优化

被引：2

作者：

丁丽亚 ^{[1
]}

金则新 ^{[2
]}

李钧敏 ^{[2
]}

机构：

[1] 北京林业大学资源与环境学院

[2] 台州学院生态研究所

来源：

福建林业科技 | 2006年 / 01期

基金：

浙江省自然科学基金;

关键词：

短柄; ISSR; 反应体系; 优化;

D O I：

10.13428/j.cnki.fjlk.2006.01.011

中图分类号：

Q943.2 [植物基因工程];

学科分类号：

071007 ; 090102 ;

摘要：

以短柄(Quercus glanduliferavar.brevipetiolata)的DNA为材料,对影响PCR扩增效果的一些因素诸如模板DNA用量、Taq酶的用量、镁离子浓度、dNTP的浓度、引物用量和牛血清白蛋白浓度等指标进行筛选和优化。结果显示适合短柄ISSR-PCR分析最适宜的PCR反应条件为:10μL PCR反应体积中,1×Taq酶配套缓冲液(10 mmol.L-1Tris-HCl,pH9.0,50 mmol.L-1KCl,0.1%Triton X-100),0.75UTaq DNA聚合酶,2 mmol.L-1MgCl2,0.2 mmol.L-14×dNTP,12 pmol引物,10 ng模板DNA,2 mg.mL-1牛血清白蛋白。短柄ISSR扩增较适宜的退火温度为54.4℃。

引用

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页数：4

共 8 条

[1] Identification of inter simple sequence repeat (ISSR) markers associated with seed size in wheat [J].