抗酶1基因转染对HeLa细胞增殖及细胞周期的抑制作用

被引：7

作者：

姜立 ^{[1
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马文丽 ^{[1
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李晋 ^{[2
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彭翼飞 ^{[1
]}

徐兵 ^{[3
]}

郑文岭 ^{[1
]}

机构：

[1] 南方医科大学基因工程研究所

[2] 南方医科大学人体解剖学教研室

[3] 南方医科大学附属南方医院

来源：

中国生物化学与分子生物学报 | 2007年 / 12期

基金：

广东省自然科学基金;

关键词：

抗酶; 细胞增殖; 细胞周期; 细胞周期素D1;

D O I：

10.13865/j.cnki.cjbmb.2007.12.014

中图分类号：

R737.33 [子宫肿瘤];

学科分类号：

100112 [医学生物化学与分子生物学];

摘要：

研究抗酶(antizyme)1对人宫颈癌HeLa细胞增殖与细胞周期的影响,并分析抗酶1对细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达影响.采用定点突变技术,将抗酶1的frameshift位点缺失,随后将突变基因重组至真核表达载体pEGFP-N1中,鉴定后转染HeLa细胞.通过MTT法检测细胞增殖变化,流式细胞术分析抗酶1对细胞周期的影响.RT-PCR和Western印迹检测抗酶1转染对细胞周期蛋白D1基因表达的影响.酶切结果显示,抗酶1突变基因成功克隆至pEGFP-N1中.成功转染HeLa细胞后,检测结果显示,抗酶1能够减慢HeLa细胞增殖速度,并使细胞停滞于G0/G1期,细胞周期蛋白D1基因的表达同时受到抑制.实验说明,抗酶1基因能够抑制HeLa细胞增殖,通过降低细胞周期蛋白D1的表达阻滞细胞周期.

引用

页码：1006 / 1011

页数：6

共 4 条

[1]

Antizyme, a natural ornithine decarboxylase inhibitor, induces apoptosis of haematopoietic cells through mitochondrial membrane depolarization and caspases' cascade [J].