重组人尿激酶原的工业化制备与性质研究

被引：5

作者：

陈于红

孙自勇

朱镇华

张菁

傅一工

朱德煦

刘建宁

机构：

[1] 南京大学分子医学研究所

[2] Landing Biotech Inc Boston

[3] 南京大学分子医学研究所南京

[4] 南京

[5] MA

[6] USA

来源：

南京大学学报(自然科学版) | 2001年 / 04期

关键词：

重组人尿激酶原; 发酵; 活化; 纯化;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q591.2 [蛋白质代谢];

学科分类号：

071010 ; 081704 ;

摘要：

将含有 pET2 9a prouk重组质粒的人尿激酶原工程菌经 10L种子罐培养及 10 0L发酵 ,IPTG诱导表达 ,其表达量为占菌体总蛋白的 2 0 % ,表达产物经体外变复性 ,CM 纤维素离子交换层析 ,Superdex 75分子筛层析及Affi preppolymyxinsupport亲和层析去热源 ,每 10 0L发酵液得重组人尿激酶原纯品 6g ,纯度达 95 %以上 ,比活大于 1.2× 10 4 IU /mg ,双链含量低于0 .5 % ,内毒素及热源含量、宿主蛋白残留量、宿主DNA残留量等均达到临床使用标准 .其分子量 (质谱测定 )、氨基酸组成、N、C 端氨基酸序列分析等均与理论值相符 .进行了等电点及肽图等性质研究

引用

页码：407 / 415

页数：9

共 4 条

[1] 重组人尿激酶原药代动力学的研究 [J].

刘秀文 ;

孙自勇 ;

窦桂芳 ;

朱镇华 ;

袁守军 ;

陈于红 ;

张菁 ;

刘建宁 ;

汤仲明 ;

刘蓓钫 .

南京大学学报(自然科学版), 2001, (04) :435-451

[2] 重组人尿激酶原药效学研究 [J].

赵专友 ;

刘蓓钫 ;

刘厚孝 ;

孙自勇 ;

张菁 ;

刘建宁 .

南京大学学报(自然科学版), 2001, (04) :420-434

[3] 重组人尿激酶原基因的克隆及工程菌的构建与鉴定 [J].

陈于红 ;

张菁 ;

朱镇华 ;

傅一工 ;

刘建宁 .

南京大学学报(自然科学版), 2001, (04) :401-406

[4] 尿激酶原活性测定方法研究 [J].

张菁 ;

朱镇华 ;

刘莉莉 ;

刘建宁 ;

朱德煦 .

南京大学学报(自然科学版), 2001, (04) :416-419

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