人类磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶的真核表达及其多克隆抗体的制备

被引：5

作者：

赵文然 ^{[1
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钟翔宇 ^{[2
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孙辉 ^{[3
]}

周令望 ^{[3
]}

曲章义 ^{[4
]}

钟学宽 ^{[3
]}

机构：

[1] 哈尔滨医科大学细胞生物学教研室

[2] 第二临床医学院普外科

[3] 中国疾病预防控制中心地方病控制中心克山病研究所

[4] 卫生微生物学教研室

来源：

中国地方病学杂志 | 2006年 / 01期

关键词：

磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶; 基因表达; 抗体; 硒;

D O I：

暂无

中图分类号：

R346 [];

学科分类号：

摘要：

目的在真核细胞中表达人磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(PHGPx)并制备抗PHGPx多克隆抗体。方法用特异引物从人睾丸组织cDNA文库中扩增出人线粒体型PHGPxcDNA,与真核表达载体pcDNA3.1/His重组,在COS-1细胞内表达PHGPx。用大肠杆菌表达的突变的PHGPx免疫动物,制备抗PHGPx抗体。结果重组体pcDNA-PHGPx转染的COS-1细胞表达了人PHGPx融合蛋白,PHGPx活性为111.5μmol·mg-1·min-1,高于对照组5倍。免疫扩散测得抗PHGPx多克隆抗血清滴度为1∶16;用于蛋白印迹时稀释倍数为1∶500,可见特异免疫沉淀条带。结论人PHGPx在COS-1细胞内获得了表达,抗PHGPx多克隆抗体有特异性,可以用于重组表达的PHGPx的鉴定。

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页数：3

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