化疗联合自噬抑制剂对结肠癌细胞钙网蛋白膜表达的影响

被引:3
作者
彭瑞清 [1 ]
李丹丹 [1 ]
丁娅 [1 ]
张星 [1 ]
张晓实 [1 ]
伍小军 [2 ]
机构
[1] 中山大学肿瘤防治中心生物治疗中心
[2] 中山大学肿瘤防治中心结直肠科
关键词
钙网蛋白; 免疫原性; 化疗; 自噬;
D O I
暂无
中图分类号
R735.35 [];
学科分类号
摘要
目的研究化疗药物联合自噬抑制剂对结肠癌细胞凋亡以及钙网蛋白(CRT)膜表达的影响。方法以结肠癌细胞HCT116作为研究对象,采用MTT法检测化疗药物奥沙利铂、5-Fu和SN38对细胞的IC50值,流式细胞术检测化疗药物处理前后的细胞凋亡率和CRT膜表达比例的变化,免疫荧光法观察药物处理前后结肠癌细胞CRT表达部位的变化,Western blotting检测药物处理对HCT116细胞自噬的影响,并用流式细胞术检测药物联合自噬抑制剂氯喹(CQ)处理前及处理12h后细胞凋亡率和CRT膜表达比例的变化。结果化疗药物奥沙利铂、5-Fu和SN38处理HCT116细胞12h后,细胞凋亡率和CRT膜表达比例均较对照组有所上升,但差异均无统计学意义。免疫荧光实验提示奥沙利铂处理后,CRT由细胞质转位至细胞膜。Western blotting结果提示3种化疗药物均可诱导HCT116细胞产生自噬,联合CQ后其诱导自噬的作用受到抑制。化疗药物联合CQ处理HCT116细胞后,细胞凋亡率和CRT膜表达比例均较未用药物处理和单纯化疗药物诱导组增高;奥沙利铂联合CQ处理后CRT膜表达比例升高,与药物处理前比较差异有统计学意义(P=0.027)。结论化疗药物奥沙利铂联合自噬抑制剂CQ能使结肠癌HCT116细胞凋亡增多,CRT膜表达比例上升。
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