块根紫金牛ISSR-PCR反应体系的建立与优化

被引：5

作者：

陈宗游 ^{[1
]}

史艳财 ^{[1
]}

罗宝丽 ^{[2
]}

邹蓉 ^{[1
]}

孔德鑫 ^{[1
]}

韦霄 ^{[1
]}

机构：

[1] 广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所

[2] 广西师范大学生命科学院

来源：

种子 | 2011年 / 07期

关键词：

块根紫金牛; ISSR-PCR; 正交设计; 单因素试验;

D O I：

10.16590/j.cnki.1001-4705.2011.07.060

中图分类号：

S567.239 [];

学科分类号：

摘要：

采用正交和单因素试验设计方法,研究Mg2+、dNTP、引物、TaqDNA聚合酶、模板DNA、退火温度及循环次数对ISSR-PCR扩增效果的影响,建立块根紫金牛ISSR-PCR反应体系和扩增程序,即25 ul的体系中含Mg2+2.0 mmol/L,dNTP 0.15mmol/L,引物1.0μmol/L,TaqDNA聚合酶1.0 U,模板DNA 50ng,10×Buffer 2.5μl。适宜的扩增程序是94℃预变性5 min,94℃变性30 s,56.6℃退火45 s,70℃延伸2.0 min;45个循环;72℃延伸7 min,4℃保存。采用正交和单因素试验可快速建立ISSR-PCR反应体系。该体系稳定、可靠,可用于块根紫金牛遗传多样性分析。

引用

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页数：4

共 11 条

[1] 白芷种质资源遗传多样性的ISSR研究 [J].