纳米载体介导人胰岛素样生长因子1基因转染兔骨髓间充质干细胞及其表达

被引：6

作者：

丁幸坡 ^{[1
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金先庆 ^{[2
]}

王智勇 ^{[1
]}

付艳丽 ^{[1
]}

机构：

[1] 河南省正骨研究院小儿骨科研究室

[2] 重庆医科大学儿科研究所外研室

来源：

中国组织工程研究与临床康复 | 2008年 / 06期

关键词：

纳米载体; 人胰岛素样生长因子1; 骨髓间充质干细胞; 生物材料;

D O I：

暂无

中图分类号：

R346 [];

学科分类号：

摘要：

目的:构建增强型绿色荧光蛋白基因(enhanced-green fluorescent protein,EGFP)标记的人胰岛素样生长因子(human insulin-like growth factor,hIGF-1)真核表达载体,转染至兔骨髓间充质干细胞,为组织工程关节软骨的构建提供基因改良的种子细胞。方法:实验于2005-03/2006-01在重庆医科大学儿科研究所完成。根据GeneBank公布的hIGF-1序列设计PCR引物,从质粒pcDNA3.1-hIGF-1中扩增出截短型hIGF-1,亚克隆至pMD-T18载体,测序鉴定后酶切出目的基因片段并插入pIRES2-EGFP中,构建成真核表达质粒pIRES2-EGFP-hIGF-1,经PCR及双酶切鉴定正确后用非病毒类纳米材料基因转移载体PAMAM-D介导转入兔骨髓间充质干细胞,通过荧光观察、流式细胞仪、RT-PCR等方法从各个水平检测hIGF-1在细胞的表达。结果:成功构建了增强型绿色荧光蛋白基因标记的真核表达质粒pIRES2-EGFP-hIGF-1,并检测到目的基因hIGF-1在兔骨髓间充质干细胞的理想表达。结论:新型纳米材料PAMAM-D是高效、简便、表达持久的基因转染方法,经IGF-1基因修饰的骨髓间充质干细胞是软骨组织工程种子细胞的理想选择。

引用

页码：1035 / 1038

页数：4

共 9 条

[1]

大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养和外源基因的导入 [J].