黄芪对D-半乳糖诱导骨髓间充质干细胞钙结节数、骨钙素mRNA 及蛋白表达水平的影响

目的运用黄芪含药血清干预D-半乳糖诱导的骨髓间充质干细胞,观察其衰老程度、钙结节数、骨钙素mRNA及蛋白表达的变化,探讨黄芪对老年性骨质疏松的防治的作用。方法实验分为6组,正常组、模型组、黄芪低剂量组、黄芪中剂量组、黄芪高剂量组、维生素D组。β-半乳糖苷酶染色法观察黄芪含药血清对衰老骨髓间充质干细胞成骨分化细胞的阳性染色率,茜素红染色观察黄芪含药血清对衰老骨髓间充质干细胞成骨分化细胞的钙结节计数,实时荧光定量法(RT-PCR)检测黄芪含药血清对衰老骨髓间充质干细胞成骨分化细胞骨钙素mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测黄芪含药血清对衰老骨髓间充质干细胞成骨分化细胞骨钙素蛋白表达。结果与正常组比较,模型组衰老骨髓间充质干细胞细胞β-半乳糖苷酶染色率显著升高(P<0.01)、茜素红染色钙结节数(P<0.05)、骨钙素mRNA及蛋白表达显著减少;与模型组比较,黄芪高剂量组及维生素D组可显著降低衰老骨髓间充质干细胞β-半乳糖苷酶染色率(P<0.01),黄芪高、中剂量组及维生素D组均可显著增加衰老骨髓间充质干细胞茜素红染色钙结节计数、骨钙素mRNA及蛋白表达量(P<0.01)。结论黄芪可延缓骨髓间充质干细胞衰老增强其成骨能力,同时可上调骨钙素mRNA及蛋白的表达,为补肾药物治疗老年性骨质疏松提供实验基础及依据。