PCR法制备地高辛标记DNA探针斑点杂交检测副溶血性弧菌tlh基因

被引:3
作者
曹小红 [1 ]
朱雪兰 [1 ]
陈艳 [2 ]
刘秀梅 [2 ]
机构
[1] 天津科技大学食品营养与安全重点实验室
[2] 中国疾病预防控制中心营养与食品安全所
关键词
弧菌,副溶血性; DNA探针; tlh基因; 斑点杂交;
D O I
10.13590/j.cjfh.2009.04.027
中图分类号
R450 [];
学科分类号
摘要
目的建立检测副溶血性弧菌种特异性tlh基因的斑点杂交方法。方法采用PCR法制备地高辛标记DNA探针,建立斑点杂交条件。杂交反应条件优化如下:杂交温度65℃,杂交时间9~12h,探针使用浓度100~125pg/ml。结果地高辛标记tlh基因探针长度为450bp,标记产量为50μg/ml。探针具有较高的灵敏度和特异性,可重复使用4次。结论本方法具有快速、简便、高效的特点,适用于副溶血性弧菌菌株的鉴定。
引用
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页码:340 / 343
页数:4
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