番茄花叶病毒单克隆抗体的制备及检测应用

用番茄花叶病毒 (ToMV)免疫的BALB c鼠脾细胞与SP2 0鼠骨髓瘤细胞融合 ,经筛选克隆 ,获得 4株能稳定传代并分泌抗ToMV单克隆抗体 (MAb)的杂交瘤细胞 ,其中 2株能同时检测ToMV和烟草花叶病毒 (TMV) ,各单克隆抗体腹水ELLSA效价在 1∶3 2 0 0 0～ 1∶1 0 2 4 0 0 0之间。经TAS ELISA测定 ,4株单克隆抗体检测病汁液的稀释度均能达到 1∶2 0 0 0倍以上。 4株单克隆抗体与其他病毒无交叉反应。Western blot分析表明 ,其中两株与ToMV1 7 6kD的外壳蛋白亚基有特异反应 ,而另两株无反应 ,推测它们是针对构象决定簇的抗体。