共 3 条
活力高于天然谷胱甘肽过氧化物酶的含硒抗体酶
被引：5
作者：
丁兰
赵大庆
倪嘉缵
罗贵民
刘仔
机构：
[1] 中国科学院长春应用化学研究所稀土化学与物理开放实验室
[2] 吉林大学酶工程国家重点实验室
[3] 长春农牧大学军事兽医研究所 长春
[4] 长春
来源：
关键词：
谷胱甘肽过氧化物酶;
含硒抗体酶;
化学诱变;
D O I：
暂无
中图分类号：
O629 [天然化合物];
学科分类号：
070303 ;
081704 ;
摘要：
还原型谷胱甘肽（GSH）的巯基和两个羧基分别与2,4-二硝基氯苯（DNCB）和甲醇反应,合成出半抗原Hp2;通过戊二醛将Hp2连到牛血清白蛋白（BSA）上,合成出全抗原Ag2;吸收光谱法测出Hp2在BSA上的平均连接量为30.2mol/mol.用标准的单克隆抗体（McAb）制备技术,制备出阳性McAb（IgG）-4G3;4G3对GSH和半抗原Hp2的解离常数（KD）表明,单克隆抗体4G3对GSH具有较强的亲和力.对4G3进行两步化学诱变（Chemical Mutation）,诱变后即为具有谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）活性的含硒抗体酶（m4G3）,m4G3的GPX活力为9337U/μmol,是兔肝GPX（RL-GPX,5780U/μmol）的 1.6倍,曾报道的含硒抗体酶m4A4（1239 U/μmol）的7.5倍,制备出活性高于天然酶的抗体酶,证实了半抗原设计思想.将m4G3拆分成Fab和Fc片段,发现m4G3的活性中心位于Fab片段上,m4G3的硒代半胱氨酸（Se-Cys）含量为1.9 mol/mol.
引用
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页数：6
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