掌叶半夏细胞悬浮培养及单细胞培养再生植株

掌叶半夏成熟胚在含2,4-D 2.0mg/L,BA 0.5mg/L的 MS培养基上可诱导形成颗粒状胚性愈伤组织。用附加2,4-D 2.0mg/L, BA 0.1mg/L,CH300mg/L的MS液体培养基对胚性愈伤组织进行悬浮振荡培养,经3～4次继代培养即可得到悬浮的单细胞,其细胞多为圆形或椭圆形,具有较强的分裂能力。经测定,悬浮培养过程中细胞生长曲线呈“S”型,培养20天时细胞数量和鲜重达到最大值;随着细胞的生长,细胞内可溶性蛋白质含量增加,培养液PH下降。悬浮单细胞经固体或液体培养分裂形成细胞团,进而形成愈伤组织,其植板率约为10-4。再生后的愈伤组织转移到含BA0.5mg/L,NAA 0.1mg/L的培养基上,光照培养,分化出了完整植株。