受NaCl诱导的盐藻果糖-1,6-二磷酸醛缩酶cDNA的克隆及其在烟草中的表达

被引:13
作者
张晓宁
林长发
王昊
曲志才
张宏伟
姚剑虹
沈大棱
陈火英
机构
[1] 复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室,复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室,复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室,复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室,复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗
关键词
盐藻; NaCI诱导; 差异表达; 叶绿体果糖-1,6-二磷酸醛缩酶; 耐盐性;
D O I
暂无
中图分类号
Q78 [基因工程(遗传工程)];
学科分类号
071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
采用快速扩增 cDNA末端(RACE)技术,获得了盐藻(Dunaliella salina)受诱导表达的果糖-1,6-二磷酸醛缩酶全长CDNA(DsALDP).蛋白质序列分析发现,DSALDP与许多植物叶绿体的果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(AldP)具有较高的同源性(66%~73%).系统进化分析进一步证明DsALDP与藻类的AldP亲缘关系最近.就表达谱而言,DsALDP是NaCl诱导下新表达的转录本,其表达水平随诱导时间的不同而呈显著变化.筛选的DsALDP cDNA构建到双元载体pBI121并导入农杆菌用以转化烟草,对4个T1代转基因植株进行Southern检测,证明DsALDP已整合入转基因植株的基因组.RT-PCR分析显示DsALDP在这些植株中均得到有效表达.生物测试表明,T1-1,T1-2和T1-3植株在100~200 mmol/L NaCl下仍保持醛缩酶活性,且其脯氨酸含量均有不同程度的升高.
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