病理性因素对体外肾小管上皮细胞表型转化的影响

目的通过低血清、高糖、高白蛋白的刺激,观察肾小管上皮细胞的表型变化。方法以体外培养的人近端肾小管上皮细胞系HKC为对象,分别用低血清(2％小牛血清)、高糖(25 mmol/L)、高白蛋白(1.5 g/L)刺激,用透射电镜检测细胞形态变化;用免疫组织化学(组化)检测角蛋白(CK)、波形蛋白(vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(SMA)、I型胶原和转化生长因子(TGF)-β1的蛋白表达;Western blot进一步检测I型胶原蛋白表达的动态变化;细胞原位杂交检测I型胶原基因表达。结果在低血清、高糖、高白蛋白直接作用下,肾小管上皮细胞形态变化明显,包括呈梭形改变。透射电镜下细胞表面微绒毛及细胞内线粒体明显减少,粗面内质网明显增加。免疫组化染色显示CK减弱,vimentin、α-SMA、I型胶原和TGF-β1增强。Western blot显示I型胶原表达增加,且与损伤程度正相关。原位杂交显示I型胶原基因表达增加。结论在低血清、高糖、高白蛋白直接作用下,体外培养的正常人近端肾小管上皮细胞系HKC发生了上皮向问叶的表型转化。