用mRNA差异显示技术分离盐胁迫下小麦耐盐相关cDNA

被引：7

作者：

刘永军 ^{[1
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景建洲 ^{[2
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贾敬芬 ^{[1
]}

李振勇 ^{[3
]}

郝建国 ^{[1
]}

陈刚 ^{[1
]}

机构：

[1] 西北大学生命科学学院

[2] 郑州轻工业学院食品与工程系

[3] 华美生物工程公司

来源：

西北大学学报(自然科学版) | 2006年 / 01期

关键词：

小麦; mRNA差异显示; 耐盐性;

D O I：

10.16152/j.cnki.xdxbzr.2006.01.021

中图分类号：

S512.1 [小麦];

学科分类号：

摘要：

目的用mRNA差异显示技术分离小麦盐胁迫应答cDNA,为进一步研究小麦耐盐机理奠定基础。方法将小麦(Triticum aesticum L.)耐盐品系宝丰7228r种子分别置于含NaC l 0‰和12‰的Hoagland培养液中生长,7d后分别取叶片,提取总RNA并分离出其中的mRNA,通过锚锭引物O ligo dT10GC反转录和9个10核苷酸随机引物进行PCR扩增。结果DDRT-PCR结果显示,有4个差异DNA片段只在盐胁迫的小麦耐盐品系基因组中表达,而在对照中没有出现。这4个差异cDNA片段分别命名为ts01(260 bp),ts02(330 bp),ts03(420 bp),ts04(600 bp)。4个差异cD-NA片段的RNA杂交结果显示,只有ts04存在明显差异,在盐胁迫条件下有杂交斑点而在对照中没有杂交斑点,其余3个cDNA片段在盐胁迫和对照中都没有杂交斑点。进一步将ts04克隆并进行DNA序列测定及同源性分析。结论ts04可能是耐盐相关cDNA片段,该片段核酸序列与麦属抗性相关的肌动蛋白基因有23%同源。

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