抗恩诺沙星单克隆抗体杂交瘤细胞株的筛选及竞争ELISA试剂盒的研制

被引:8
作者
赵银丽 [1 ,2 ]
王建华 [1 ]
王自良 [3 ]
滕蔓 [4 ]
刘庆堂 [4 ]
邓瑞广 [4 ]
范国英 [3 ]
张改平 [4 ]
机构
[1] 西北农林科技大学动物医学院
[2] 河南工业大学生物工程学院
[3] 河南科技学院
[4] 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室
关键词
恩诺沙星; 杂交瘤细胞; 竞争ELISA试剂盒;
D O I
暂无
中图分类号
S859.84 [动物性食品中化学物残留];
学科分类号
0906 ;
摘要
利用合成的完全抗原(BSA-ENR)免疫小鼠,通过细胞融合技术和间接竞争ELISA筛选出了能分泌恩诺沙星单克隆抗体的杂交瘤细胞株,以此为基础研制恩诺沙星残留检测的竞争ELISA试剂盒(competitive ELISA ENR-Kit),并测定其性能。结果表明:筛选出的2株杂交瘤细胞,单抗亚类均为IgG1型,其中4G1-B3株的ENR mAb间接ELISA效价为1:1.024×106,亲和常数(Ka)为9×1010L/mol;竞争ELISA试剂盒的线性检测范围为0.05~101.6μg/L、灵敏度0.05μg/L、半数抑制浓度(IC50)1.1μg/L,与其他化合物的交叉反应率(CR%)均小于0.01%,鸡肉样、鸡肝样、鱼肉样和牛奶样的平均添加回收率分别为81.5%8、7.6%、84.3%和95%,不同基质添加恩诺沙星标准品做竞争ELISA对ENR-Kit检测结果影响小,试剂盒保存期6个月以上。结果说明该竞争ELISA试剂盒具有快速、敏感、特异、简便等特点,适用于ENR残留的快速检测。
引用
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