多重PCR快速鉴定大肠杆菌O157

被引:12
作者
梅明珠 [1 ]
严亚贤 [1 ]
陆承平 [1 ]
刘佩红 [2 ]
王建 [2 ]
沈莉萍 [2 ]
机构
[1] 上海交通大学农业与生物学院
[2] 上海市畜牧兽医站
关键词
大肠杆菌O157; PCR; rfbE; vt1; vt2; eae;
D O I
暂无
中图分类号
R450 [];
学科分类号
摘要
目的根据GenBank中编码大肠杆菌16SrRNA的基因、rfbE(O157抗原基因)、vt1(Vero毒素1基因)、vt2(Vero毒素2基因)和eaeA(紧密素基因)5种基因的特异性序列,设计合成5对引物,建立了快速鉴定大肠杆菌O157的多重PCR方法。该方法的检测敏感度为细菌纯培养物为104CFU/ml,含菌3-4CFU/g鸡肉组织样品经预增菌8h后能检出。用此方法检测2000-2004年间从动物组织和粪便中临床分离的64株菌株,结果10株鉴定为大肠杆菌O157,与血清凝集试验结果完全吻合。其中8株能扩增上述5条特异性条带,与预期产物完全一致,2株能扩增出除vt1基因外的4条特异性条带,其它54株菌株只能扩增出大肠杆菌16SrRNA。该方法能直接鉴定产多种毒力因子的大肠杆菌O157,特异性强,为检测和鉴定大肠杆菌O157提供了一个新方法。
引用
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页数:4
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