大血藤ISSR-PCR反应体系的建立

被引:9
作者
蔡琰琳 [1 ]
金则新 [2 ]
李钧敏 [2 ]
机构
[1] 杭州师范学院生命科学学院
[2] 台州学院生态研究所
关键词
大血藤; ISSR; 反应体系; 优化;
D O I
10.13836/j.jjau.2006129
中图分类号
S567.19 [];
学科分类号
1008 ;
摘要
采用改进的SDS法抽提大血藤基因组DNA,分析了镁离子、dNTP、模板DNA含量、引物浓度、Taq DNA聚合酶量和BSA浓度对大血藤ISSR-PCR扩增结果的影响,建立了稳定的、可重复的大血藤ISSR最佳反应体系:10μL PCR反应体积中,4×Taq酶配套缓冲液(10 mmol/L Tris-HC l,pH9.0,50 mmol/L KC l,1 g/LTriton X-100),0.5U Taq DNA聚合酶,2 mmol/L MgC l2,0.1 mmol/L dNTP,12 pmol引物,10 ng模板DNA,2 mg/mL牛血清白蛋白。大血藤的最适退火温度为52.4℃。
引用
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