白杨素提高肿瘤坏死因子-α诱导肝癌细胞HepG2凋亡能力的研究

被引：15

作者：

李欣 ^{[1
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王剑宁 ^{[2
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熊习昆 ^{[1
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陈美芬 ^{[1
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古梅英 ^{[1
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杨颖 ^{[1
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王凤岩 ^{[1
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杨杏芬 ^{[1
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黄俊明 ^{[1
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机构：

[1] 广东省疾病预防控制中心毒理所

[2] 中山大学光华口腔医学院附属口腔医院口腔颌面外科

来源：

中草药 | 2010年 / 41卷 / 11期

基金：

广东省自然科学基金;

关键词：

白杨素; 肿瘤坏死因子(TNF-α); 细胞凋亡;

D O I：

暂无

中图分类号：

R735.7 [肝肿瘤];

学科分类号：

100112 [医学生物化学与分子生物学];

摘要：

目的研究白杨素提高肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导肝癌细胞HepG2凋亡的能力,并对其分子机制进行初步探讨。方法白杨素以不同浓度(10、20、40μmol/L)单独或联合TNF-α(10 ng/mL)处理HepG2细胞后,于普通及荧光倒置显微镜下观察细胞形态变化,获得细胞死亡的定性资料;流式细胞术检测sub-G1峰,分析峰值变化规律,获得细胞死亡的定量资料;并以Western blotting方法检测凋亡标志蛋白caspase-3、caspase-8和PARP原蛋白和相应的裂解产物的变化情况及凋亡抑制蛋白Bcl-xL、cIAPs、xIAP、cFLIP的时间-效应变化规律。结果形态学观察可发现白杨素联合TNF-α处理HepG2细胞后,与对照组比较细胞出现明显的死亡数量增加,而单独白杨素组、TNF-α组与对照组比较则未观察到明显的细胞减少(P>0.05);流式细胞术分析sub-G1的定量资料也支持这一结果,联合处理组sub-G1值随着白杨素剂量增加而增大,最高达到(27.84±0.54)%,与对照组比较有显著差异(P<0.05),Hochest 33342荧光染色在联合处理组可观察到明显的核固缩细胞增加;Western blotting检测到凋亡标志蛋白caspase-3、caspase-8和PARP原蛋白减少、相应的活化裂解片段出现;全caspase酶抑制剂z-VAD-fmk可有效抑制联合处理组HepG2细胞死亡、sub-G1峰消失比值减少,阻止凋亡标志蛋白caspase-3、caspase-8和PARP的活化降解;TNF-α引起的凋亡抑制蛋白cFLIP-1表达量增加,随联合处理时间延长而明显下调,与对照组比较有明显差异,Bcl-xL、xIAP等其他凋亡抑制蛋白没有明显改变。结论白杨素能够有效提高TNF-α诱导HepG2细胞凋亡的能力,NF-κB调节的凋亡抑制蛋白cFLIP-1表达减少是其重要的分子机制。

引用

页码：1828 / 1834

页数：7

共 9 条

[1]

NFκB signaling in carcinogenesis and as a potential molecular target for cancer therapy [J].