流行性乙型脑炎病毒一步法RT-LAMP检测方法的建立

被引:8
作者
杜鹃 [1 ,2 ]
宋永 [1 ]
刘立科 [2 ]
华荣虹 [2 ]
机构
[1] 黑龙江大学生命科学学院
[2] 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室
关键词
流行性乙型脑炎病毒; 反转录环介导等温扩增技术;
D O I
暂无
中图分类号
S854.43 [];
学科分类号
摘要
为建立一种简便、快速、灵敏、特异的乙型脑炎病毒(JEV)检测方法,本研究根据GenBank中登录的25株流行性JEV基因组序列,设计3对特异性的环介导等温扩增(LAMP)引物,优化反应体系,建立了一步法反转录-LAMP(RT-LAMP)检测方法。该方法检测时间短,灵敏度比常规RT-PCR方法高,可检测出103TCID50/0.2mL JEV;特异性强,对猪细小病毒、猪圆环病毒、伪狂犬病毒、猪瘟病毒等常见猪病毒均无交叉反应。结果判定时只需要在扩增产物中加入SYBR GreenⅠ染料,就可以直接在可见光或紫外光下观察颜色变化。该方法简便快捷,省时省力,是一种适用于基层实验室快速、准确检测流行性JEV的方法。
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