小叶杨胆碱单氧化物酶(CMO)基因的克隆与转化杂种落叶松及表达

被引:9
作者
张守攻 [1 ]
韩素英 [1 ]
汪泉 [1 ]
刘国华 [2 ]
周春娥 [3 ]
齐力旺 [1 ]
机构
[1] 中国林科院林业研究所细胞生物学实验室
[2] 重庆文理学院生命科学系
[3] 河南师范大学生命科学院
关键词
小叶杨; CMO基因; 转录因子; 杂种落叶松;
D O I
暂无
中图分类号
S792.116 [小叶杨]; S791.22 [落叶松];
学科分类号
摘要
甜菜碱是在生物界广泛存在的一类细胞相容性物质,它不仅能使细胞在干旱等胁迫条件下与环境保持渗透平衡,而且还具有稳定复杂蛋白质高级结构的能力。胆碱单氧化酶(CMO)在植物体中是催化胆碱转变为甜菜碱的关键酶,单独转化CMO基因的转基因植物可以完成甜菜碱的合成,起到抗盐、耐旱的作用。小叶杨是我国特有乡土树种,具有抗旱、耐瘠薄、适应性广、生长优良、寿命长等特性,在荒沙及黄土高原区均能生长。本研究以小叶杨为材料构建了干旱胁迫和正常生长条件下的cDNA文库,以特异性引物从中扩增出一条1269bp大小的DNA片段,经序列分析证实该片段编码胆碱单氧化物酶(CMO);将该片段构建入植物表达载体pBI121中,在落叶松杂交育种中利用花粉管通道法将带有该CMO基因的植物表达质粒转入杂种落叶松,收获球果取出种子,提取转化种子发芽长出幼芽的DNA,特异性PCR扩增和Southern、WesternBlotting检测证实落叶松中CMO基因的插入。因此,我们不仅克隆得到了小叶杨编码胆碱单氧化物酶(CMO)的基因,还将其导入杂种落叶松,得到CMO超重表达的转基因杂种落叶松。
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