人血管内皮生长因子mRNA靶向siRNA表达载体的构建和表达

被引：3

作者：

丁培杰 ^{[1
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杨书钦 ^{[2
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曹明瑞 ^{[3
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臧文巧 ^{[4
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陈宗德 ^{[4
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赵国强 ^{[4
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机构：

[1] 漯河医学高等专科学校微生物学与免疫学教研室

[2] 河南省煤田地质局一队医院

[3] 郑州大学第一附属医院妇产科

[4] 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室

来源：

郑州大学学报(医学版) | 2007年 / 02期

关键词：

RNA干扰; VEGF; 表达;

D O I：

10.13705/j.issn.1671-6825.2007.02.014

中图分类号：

R73-3 [肿瘤学实验研究];

学科分类号：

100214 ;

摘要：

目的:构建人血管内皮生长因子(VEGF)mRNA靶向siRNA表达载体,观察其表达情况。方法:设计人VEGF靶向的发夹样siRNA,依据设计,合成2条互补的寡核苷酸链,退火后连接入pSUPERneo-GFP载体,转化扩增后得到重组载体pSUPERneo-GFP-siVEGF,进行序列测定。用脂质体转染法将重组载体转染食管癌细胞株Eca109,采用RT-PCR检测转染细胞VEGF mRNA的表达水平。结果:经过酶切鉴定与测序,pSUPERneo-GFP-siVEGF构建成功。稳定转染该重组体的Eca109细胞VEGF mRNA表达水平明显降低。结论:成功构建了针对VEGF mRNA的siRNA载体,转染细胞后可显著抑制VEGF mRNA的表达。

引用

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