人肾小管上皮细胞血清饥饿法同步化方法的研究附视频

被引：8

作者：

何丽洁 ^{[1
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王汉民 ^{[1
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杨桂涛 ^{[2
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陈光磊 ^{[1
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陈威 ^{[1
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杨东 ^{[3
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刘宏宝 ^{[1
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白淑蓉 ^{[1
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沈青 ^{[1
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机构：

[1] 第四军医大学西京医院肾脏内科

[2] 第四军医大学西京医院医教部

[3] 第四军医大学西京医院中医科

来源：

细胞与分子免疫学杂志 | 2007年 / 03期

关键词：

肾小管上皮细胞; 同步化; 血清饥饿法; G0/G1阻滞;

D O I：

10.13423/j.cnki.cjcmi.004171

中图分类号：

Q813.1 [细胞、组织培养技术];

学科分类号：

0836 ; 090102 ;

摘要：

目的:探讨采用血清饥饿法建立将人肾小管上皮细胞(HKC)的同步化方法。方法:将HKC分为6个不同低血清浓度组及对照组,分别采用胎牛血清浓度为0、1、2、3、4、5和100 mL/L的DMEM培养液培养24 h。根据流式细胞术结果选择的最佳同步化HKC的胎牛血清浓度。将HKC的同步化处理时间分别延长为24 h、48 h和72 h,选择最佳同步化时间。用MTT法绘制生长曲线观察血清饥饿处理对HKC生长的影响。采用免疫细胞化学方法验证血清饥饿同步化处理HKC的效果。结果:选择无血清(0 mL/L)和1 mL/L为HKC最佳同步化的胎牛血清浓度,选择48 h为HKC同步化最佳时间。细胞生长曲线表明采用1 mL/L胎牛血清的DMEM培养液培养48 h后恢复正常培养的HKC细胞,其生长曲线更接近于正常培养的细胞。Brdu进一步证明,用1 mL/L胎牛血清的DMEM培养液培养48 h可以使90%以上的HKC细胞处于G0/G1期。结论:用1 mL/L胎牛血清的DMEM培养液培养48 h可获得90%以上的G0/G1期HKC。

引用

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