不同方法检测成骨细胞中碱性磷酸酶的比较

目的　探讨不同缓冲液和不同裂解方法对体外培养成骨细胞内碱性磷酸酶 (alkalinephosphatase,ALPase)活性的影响 ,建立较为理想的检测方法和条件 ,为研究骨代谢异常及骨质疏松症等骨病提供简便可靠的检测手段。方法　采取经体外培养 72h的成骨细胞 ,制备上清液、细胞裂解液和细胞反复冻融液样本 ,分别用二乙醇胺 (DEA)、碳酸盐 (CO=3)、2 氨基 2 甲基 1 内醇 (AMP)等 3种不同缓冲液种类的试剂 ,测定上述液体中的ALPase活性。结果　使用DEA缓冲液的 3种样本的测量值都为最高 ,且不精密度 (CV)较其他两种缓冲液小 ,各组比较分析 ,差异均有显著性 (P <0 .0 1 )。使用 3种缓冲液试剂 ,均以裂解液中ALP活性最高 ,而冻融液次之 ,上清液最低 ,分析结果 ,差异均有显著性 (P <0 .0 1 )。结论　用DEA缓冲液测量细胞裂解液体外培养成骨ALPase活性的效果较理想