基因工程菌高密度发酵液中碳源物质甘油的定量检测及其浓度的优化控制

比较了高碘酸氧化法、铜离子络合法、高压液相色谱法和甘油激酶法四种不同的方法定量测定重组工程菌ＹＫ５３７／ｐＳＢ－ＴＫ高密度发酵液中甘油（作为细菌生长的碳源物质）的浓度，发现甘油激酶法可以排除发酵液中其他物质的干扰，精确测定甘油的含量。在此基础上对发酵培养基中甘油的浓度进行了优化，结果表明，甘油浓度控制在较低的水平有利于菌体密度的提高。在５Ｌ自动发酵罐中，控制甘油浓度在５ｇ／Ｌ左右，经２０ｈ的培养，最终细菌密度达到１２０ＯＤ６００（相当于４８ｇＤＣＷ／Ｌ），重组蛋白ｒｈＴＮＦα的表达量占细菌总蛋白的３０％左右。