草莓果实cDNA文库的构建及鉴定

被引：8

作者：

张少会

沈元月

机构：

[1] 北京市农业应用新技术重点实验室,北京农学院植物科学技术学院

来源：

北京农学院学报 | 2014年 / 29卷 / 02期

关键词：

草莓果实; RNA提取; cDNA文库;

D O I：

10.13473/j.cnki.issn.1002-3186.2014.0052

中图分类号：

S668.4 [草莓];

学科分类号：

090201 [果树学];

摘要：

草莓是研究果实发育的模式植物。基因表达谱分析已成为目前分子生物学领域重要的研究方向。草莓cDNA文库构建是研究果实发育基因表达的基础工作。本研究从草莓白果中提取高质量的总RNA,通过MMLV反转录酶的作用,把RNA中的mRNA反转成cDNA第一链,再利用特异引物通过LD-PCR扩增合成双链cDNA。将纯化带有黏性末端的双链cDNA与λTrip I Ex2载体进行连接,最后对重组载体进行E.coli XL1-Blue体外包埋为cDNA原始文库。经过鉴定,原始文库的滴度为1.13×10-7 cfu/mL,重组率为100%,插入片段多分布在0.2～2.0kb之间,表明构建的草莓果实cDNA文库质量较高,能够满足后续的分子生物学研究工作的需要,同时也为其他果树相关研究提供借鉴。

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