表达BCRP的卵巢癌耐药细胞系3AO/BCRP的建立及其生物学特征

被引:8
作者
李文通 [1 ]
周庚寅 [1 ]
宋现让 [2 ]
迟伟玲 [3 ]
任瑞美 [2 ]
王兴武 [2 ]
机构
[1] 山东大学医学院病理教研室
[2] 山东省肿瘤医院基础研究中心
[3] 山东大学医学院分子生物学教研室
关键词
乳腺癌耐药蛋白; 多药耐药; 卵巢癌; 基因表达; 定量PCR;
D O I
暂无
中图分类号
R737.31 [卵巢肿瘤];
学科分类号
100214 [肿瘤学];
摘要
目的探讨乳腺癌耐药蛋白(BCRP)在卵巢癌中的作用和逆转其介导的MDR,建立表达BCRP的耐药细胞系3AO/BCRP。方法提取MCF-7细胞的总RNA,设计BCRP基因上下游引物,RT-PCR克隆出BCRP基因全长并连接到pcDNA3.1(-)上,转染3AO细胞后以G418筛选存活细胞。采用米托蒽醌外排实验、细胞毒性实验、细胞群体倍增时间、定量PCR、Western blot等方法鉴定构建的耐药细胞系。结果3AO/BCRP对米托蒽醌耐药指数增加至11.58;耐药细胞外排米托蒽醌的作用增强;细胞中BCRPmRNA的水平升高,细胞能表达一定量的BCRP。结论3AO/BCRP细胞具有BCRP的耐药表型,可作为进一步研究BCRP的生物学特性以及建立其介导的耐药逆转模型。
引用
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