多重RT-PCR同时检测鉴别三种对虾病毒的研究与应用

被引:14
作者
谢芝勋
庞耀珊
邓显文
唐小飞
刘加波
机构
[1] 广西壮族自治区兽医研究所,广西壮族自治区兽医研究所,广西壮族自治区兽医研究所,广西壮族自治区兽医研究所,广西壮族自治区兽医研究所广西南宁,广西南宁,广西南宁,广西南宁,广西南宁
关键词
多重聚合酶链式反应; 对虾; 桃拉综合征病毒; 白斑综合征病毒; 传染性皮下和造血器官坏死病毒;
D O I
10.13242/j.cnki.bingduxuebao.001572
中图分类号
S945.1 [虾类];
学科分类号
摘要
根据基因库中对虾桃拉综合征病毒(TSV)、白斑综合征病毒(WSSV)、传染性皮下和造血器官坏死病毒(I-HHNV)的基因序列,分别设计了三对特异性引物,通过对多重RT-PCR扩增条件的优化,研究建立了可同时检测鉴别TSV、WSSV和IHHNV的多重RT-PCR。该技术对同一样品中的TSV RNA、WSSV DNA和IHHNV DNA模板进行扩增,结果均同时得到3条大小与实验设计相符的231bp(TSV)、593bp(WSSV)和356bp(IHHNV)的特异性多重RT-PCR扩增带,对其它对虾病原核酸的扩增结果为阴性。敏感性试验结果表明,该技术最低能检测到10pg TSV RNA、100pg WSSV DNA和100pg IHHNV DNA。临床检测试验结果表明,该技术对TSV、WSSV和I-HHNV的检出率明显高于传统的临床症状观察和组织病理学检查,提示该技术适用于这三种病毒的临床快速检测和鉴别诊断。
引用
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