不同引物对检测柑桔黄龙病菌灵敏度比较

被引：18

作者：

丁芳 ^{[1
]}

王国平 ^{[1
]}

易干军 ^{[2
]}

洪霓 ^{[1
]}

钟云 ^{[2
]}

机构：

[1] 华中农业大学植物科学技术学院

[2] 广东省农业科学院果树研究所

来源：

植物保护学报 | 2007年 / 04期

关键词：

柑桔黄龙病; 常规PCR; 半巢式PCR; 巢式PCR; 灵敏度;

D O I：

10.13802/j.cnki.zwbhxb.2007.04.022

中图分类号：

S436.66 [柑桔类病虫害];

学科分类号：

090401 ; 090402 ;

摘要：

对目前常用的5对引物(fOI1/rOI2c、fOI2/r23S1、fA2/rJ5、fP535/rP535、fP400/rP400)检测柑桔黄龙病菌的灵敏度进行了比较。结果发现,不同引物对的检测灵敏度不同,5对引物检测灵敏度由高到低依次为:fP400/rP400>fP535/rP535>fA2/rJ5>fOI1/rOI2c>fOI2/r23S1;引物对fP400/rP400比广谱引物对fOI2/r23S1的灵敏度高近千倍。半巢式PCR及巢式PCR的检测灵敏度远高于常规PCR,可检测出接近极限浓度10-7ng/μL,二者没有明显的差别。因此,按照不同目的选择合适的检测引物非常重要,特别是当待测样品中的黄龙病菌浓度极低时,应选择高灵敏度的小片段特异性引物对。

引用

收藏

页码：364 / 368

页数：5

相关论文

共 12 条

[1] 柑桔黄龙病的常规PCR及荧光定量PCR检测 [J].

胡浩 ;

殷幼平 ;

张利平 ;

赵云 ;

夏玉先 ;

王中康 ;

覃健 .

中国农业科学, 2006, (12) :2491-2497

[2] 应用PCR及Nested-PCR技术检测柑橘黄龙病病原研究 [J].

丁芳 ;

易干军 ;

王国平 .

园艺学报, 2004, (06) :803-806

[3] 不同引物对植原体的检测灵敏度比较研究附视频 [J].

葛泉卿 .

植物检疫, 2003, (03) :133-136

[4] 不同引物检测肺炎支原体的研究 [J].

詹群珊 ;

吴旗 ;

曾真 .

河北医学, 2002, (08) :673-675

[5] 应用Nested PCR技术检测柑桔木虱及其寄主九里香的柑桔黄龙病带菌率 [J].

李韬 ;

柯冲 .

植物保护学报, 2002, (01) :31-35

[6] 柑桔黄龙病病原DNA片段的克隆及序列分析 [J].

孔维文 ;

邓晓玲 ;

梁志慧 ;

唐伟文 .

植物病理学报, 2000, (01) :71-75

[7] 适于AFLP分析用的荔枝DNA提取方法 [J].

易干军 ;

霍合强 ;

蔡长河 ;

邱燕萍 ;

黄自然 ;

陈大成 .

华南农业大学学报, 1999, (03) :123-124

[8] 应用多聚酶链式反应（PCR）技术检测和定量分析柑桔黄龙病病原 [J].

田亚南 ;

柯穗 ;

柯冲 .

植物病理学报, 1996, (03) :53-60

[9] Detection and identification of the two Candidatus Liberobacter species associated with citrus huanglongbing by PCR amplification of ribosomal protein genes of the β operon [J].

Hocquellet, A ;

Toorawa, P ;

Bové, JM ;

Garnier, M .

MOLECULAR AND CELLULAR PROBES, 1999, 13 (05) :373-379

[10] Isolation of DNA from the uncultured "Candidatus Liberobacter" species associated with citrus Huanglongbing by RAPD [J].

Hocquellet, A ;

Bové, JM ;

Garnier, M .

CURRENT MICROBIOLOGY, 1999, 38 (03) :176-182