短链脂肪酸的梯度高效液相色谱法分析研究

目的 :探讨测定甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、琥珀酸、戊酸、乳酸的分离条件 ,为检测细菌终末代谢酸奠定基础。方法 :采用反相梯度高效液相色谱技术对同时分离 7种短链脂肪酸所需的检测波长、流动相及梯度洗脱程序等条件进行研究。结果 :高效液相色谱技术在流速 1 0～ 2 0ml min ,检测波长 2 17nm ,流动相为 6 0 % 0 2mol L磷酸盐甲醇溶液pH 2 8的条件下 ,采用线性梯度洗脱 ,能同时分离甲酸、乳酸、乙酸、琥珀酸、丙酸、丁酸、戊酸 ,其保留时间分别为 :3 5 4、4 31、4 6 1、5 82、6 5 0、14 72、2 4 75min。此方法的相对标准差 (RSD)为 1 8% ,平均回收率为 92 % ,重复性变异系数小于 4%。结论 :反相梯度高效液相色谱技术可测定同一标本中的乳酸、甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、琥珀酸、戊酸 7种短链脂肪酸 ,这一结果为测定细菌终末代谢酸提供了重要的手段