正交法用于真菌微卫星PCR体系优化

被引：7

作者：

杨艳秋 ^{[1
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贺丹 ^{[1
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王爽 ^{[1
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郭亮 ^{[1
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张宇 ^{[1
]}

横山耕治 ^{[2
]}

王丽 ^{[1
]}

机构：

[1] 吉林大学基础医学院病原生物学教研室

[2] 日本国立千叶大学真菌医学研究中心

来源：

吉林大学学报(医学版) | 2006年 / 06期

关键词：

真菌; 微卫星重复; 聚合酶链反应; 正交法;

D O I：

10.13481/j.1671-587x.2006.06.069

中图分类号：

Q93-33 [微生物学技术与微生物学实验];

学科分类号：

071005 ; 100705 ;

摘要：

目的:探讨影响真菌微卫星聚合酶链反应(SSR-PCR)的多个因素,建立PCR的最佳反应体系,为进一步进行真菌的鉴定、遗传多样性研究奠定基础。方法:利用正交设计,从Taq DNA聚合酶、模板DNA、dNTP、引物4种因素,对真菌微卫星反应体系进行优化分析,并确定PCR适宜的退火温度及循环次数。结果:各因素的不同水平对PCR结果都有显著影响,其中模板DNA影响最大。在PCR反应体系中(25μL),Taq DNA聚合酶1U,模板DNA 30 ng,dNTP 150μmol.L-1,引物0.25μmol.L-1为最佳。结论:采用正交法实验设计,对真菌微卫星PCR体系优化更科学,得出的实验体系有效范围宽,且高效、快捷。

引用

页码：1108 / 1111

页数：4

共 6 条

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