鸭β-防御素10基因的克隆、遗传进化分析及其生物学特性的初步研究

被引：9

作者：

廖文艳 ^{[1
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马得莹 ^{[1
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王瑞琴 ^{[1
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韩宗玺 ^{[2
]}

邵昙昊 ^{[2
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李慧昕 ^{[2
]}

刘胜旺 ^{[2
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机构：

[1] 东北农业大学动物营养研究所

[2] 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

来源：

畜牧兽医学报 | 2009年 / 40卷 / 09期

关键词：

鸭; AvBD10; 重组蛋白; 抗菌活性;

D O I：

暂无

中图分类号：

S834 [鸭];

学科分类号：

0905 ;

摘要：

旨在从鸭肝脏组织中克隆鸭β-防御素10(AvBD10)基因,并在原核表达重组鸭AvBD10蛋白,研究重组鸭AvBD10蛋白的体外抗菌活性与理化特性。试验采用RT-PCR法,从鸭肝脏组织中扩增鸭AvBD10基因,测定该基因在鸭各组织器官中的分布;将鸭AvBD10基因克隆到大肠杆菌原核表达载体pGEX-6p-1上,构建重组表达质粒pGEX-duck AvBD10,将重组质粒转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导表达;亲和层析纯化蛋白,利用薄层平皿琼脂糖孔穴扩散法测定重组鸭AvBD10蛋白的体外抗菌活性与理化特性。结果表明,鸭AvBD10 cDNA大小为169bp,编码55个氨基酸残基,与鸡AvBD10氨基酸同源性为85.5%。该基因仅在不同日龄鸭肝脏与肾脏组织中大量表达。重组鸭AvBD10融合蛋白的分子量约为30 ku,重组蛋白占菌体总蛋白的34%。重组鸭AvBD10蛋白对多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌有抗菌活性。结果,从鸭肝脏组织中扩增了鸭AvBD10基因,该基因仅在不同日龄鸭肝脏与肾脏组织中大量表达。重组鸭AvBD10融合蛋白具有广谱抗菌活性,该重组蛋白对温度和酸碱度有很高的稳定性。

引用

页码：1320 / 1326

页数：7

共 25 条

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