对虾Taura综合症病毒Taqman实时定量RT-PCR检测方法的建立与应用

被引：4

作者：

岳志芹 ^{[1
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刘荭 ^{[2
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梁成珠 ^{[1
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高宏伟 ^{[1
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雷质文 ^{[1
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徐彪 ^{[1
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朱来华 ^{[1
]}

江育林 ^{[2
]}

机构：

[1] 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心

[2] 深圳出入境检验检疫局水生动物疫病国家重点实验室

来源：

中国预防兽医学报 | 2008年 / 02期

关键词：

TSV; 实时定量RT-PCR; Taqman探针;

D O I：

暂无

中图分类号：

S945.1 [虾类];

学科分类号：

摘要：

建立了Taqman实时定量RT-PCR方法检测对虾的Taura综合症病毒(Taura syndrome virus,TSV)。选取TSV基因组的保守序列,利用Primer Express 2.0软件设计引物和探针,扩增产物长度为73bp。以含有TSV目的扩增片段的质粒为标准品,进行实时定量RT-PCR反应,结果表明质粒DNA在6～6×106个拷贝,共7个数量级的范围内有"S"型扩增曲线。根据病毒拷贝数与Ct值制备了标准曲线,可以用于病毒的定量分析。该方法的检测灵敏度为6个病毒粒子。该方法的重现性好,组内的实验变异系数为0.04%～2.70%,组间实验变异系数为0.92%～4.67%。引物和探针对于对虾基因组RNA、黄头病毒RNA都没有扩增反应,表现出良好的特异性。实时定量RT-PCR检测TSV方法的建立,对于虾病的临床诊断及流行病学研究具有重要意义。

引用

页码：141 / 144

页数：4

共 6 条

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