改良环介导等温扩增技术快速检测肉类中的大肠杆菌O157:H7

被引：12

作者：

刘道亮

胡连霞

赵占民

孙晓霞

张峻峰

机构：

[1] 河北出入境检验检疫局

来源：

微生物学通报 | 2011年 / 38卷 / 03期

关键词：

环介导等温扩增; LAMP; 检测; 大肠杆菌O157:H7; 肉类;

D O I：

10.13344/j.microbiol.china.2011.03.016

中图分类号：

TS251.7 [产品标准与检验];

学科分类号：

摘要：

针对大肠杆菌O157:H7(Escherichia coli O157:H7,E.coli O157:H7)传统检测方法检测周期长的问题,建立了肉类中的E.coli O157:H7的改良环介导等温扩增(LAMP)快速检测方法。以E.coli O157:H7的O157特异性抗原rfbE基因、鞭毛H7特异性抗原fliC基因序列作为靶序列,分别设计2套增加了环引物的改良LAMP引物序列,单管同时检测,通过肉眼观察白色沉淀,判断检测结果。采用36株细菌验证了该改良LAMP引物的特异性。热裂解法提取的DNA经改良LAMP体系扩增20 min,检测E.coli O157:H7的灵敏度为1.4 CFU/mL,人工污染肉中的E.coli O157:H7检出限为1.8 CFU/g。137份实样中,检测出1份E.coli O157:H7假阳性,与行业标准SNT0973-2000符合率达到99.3%。

引用

页码：430 / 435

页数：6

共 8 条

[1] 肠出血性大肠杆菌O157:H7多重PCR快速检测研究 [J].

吴家林 ;

肖勇 ;

凌霞 ;

沙丹 ;

张敬平 .

现代预防医学, 2009, 36 (01) :117-119

[2] 实时PCR在大肠杆菌O157∶H7快速检测中的应用 [J].

张建华 ;

陆群英 ;

程苏云 ;

卢亦愚 ;

叶菊莲 ;

罗芸 .

中国人兽共患病学报, 2007, (08) :839-841+738

[3] 多重PCR方法检测大肠杆菌O157∶H7的初步研究 [J].

朱文冠 ;

薛素强 ;

洪洁心 ;

崔剑峰 ;

郭霄峰 .

中国人兽共患病学报, 2006, (05) :428-432

[4] 用于PCR检测的乳品中金黄色葡萄球菌DNA提取方法比较研究 [J].

杨洋 ;

张伟 ;

袁耀武 ;

何俊萍 ;

马晓燕 ;

丁鑫 ;

王呸玉 .

食品与发酵工业, 2005, (09) :95-99

[5] 大肠杆菌O157:H7rfbE基因和fliC基因的克隆与序列分析 [J].

朱文冠 ;

杨德胜 ;

郭霄峰 .

中国动物检疫, 2005, (09) :25-27

[6] Accelerated reaction by loop-mediated isothermal amplification using loop primers [J].

Nagamine, K ;

Hase, T ;

Notomi, T .

MOLECULAR AND CELLULAR PROBES, 2002, 16 (03) :223-229

[7] Detection of loop-mediated isothermal amplification reaction by turbidity derived from magnesium pyrophosphate formation [J].

Mori, Y ;

Nagamine, K ;

Tomita, N ;

Notomi, T .

BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS, 2001, 289 (01) :150-154

[8]

Use of Real-Time Polymerase Chain Reaction and Molecular Beacons for the Detection of Escherichia coli O157:H7[J] . Nathalie Y. Fortin,Ashok Mulchandani,Wilfred Chen.Analytical Biochemistry . 2001 (2)

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