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猪内源性反转录病毒感染HEK293细胞模型的建立
被引:5
作者:
吕茂民
贾莉玮
斯日古愣
杨文斌
杨姝
章金刚
机构:
[1] 军事医学科学院野战输血研究所
来源:
基金:
北京市自然科学基金;
关键词:
细胞,HEK293;
模型,动物;
感染;
猪,内源性逆转录病毒;
D O I:
暂无
中图分类号:
R-332 [医用实验动物学];
学科分类号:
摘要:
目的 建立猪内源性反转录病毒感染HEK2 93细胞的模型 ,验证PERV在体外对人源细胞的感染性 ,并进一步研究PERV的生物学特性。方法 将G4 18抗性的HEK2 93细胞与猪源PK 15细胞共培养 ,6周后 ,用含有6 0 0 μg mlG4 18的选择性培养基对共培养细胞进行加压筛选 ,用以除去共培养体系中的PK 15细胞 ;然后应用PCR及RT PCR的方法对所制备的感染细胞模型进行系统鉴定。结果 经 6周共培养及 3周加压筛选后 ,细胞的形态、生长速度及折光性均未见明显变化 ;PCR及RT PCR鉴定表明 ,筛选后的共培养体系中已没有PK 15细胞的存在 ;PERV特异性检测方法检测显示 ,该细胞模型的DNA中已有PERV的整合且有PERV特异性mRNA的表达。结论 本实验成功建立了PERV感染HEK2 93细胞的模型 ,证实了PERV在体外对人源细胞具有感染性 ;为PERV生物学特性的研究奠定了基础
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