人vWF-A1区蛋白的表达及其对血小板聚集的抑制作用

被引：9

作者：

祝怀平

王迎春

白霞

季顺东

张威

邵波静

朱明清

阮长耿

机构：

[1] 苏州大学附属第一医院,江苏省血液研究所,南通医学院附院,苏州大学附属第一医院,江苏省血液研究所,苏州大学附属第一医院,江苏省血液研究所,苏州大学附属第一医院,江苏省血液研究所,苏州大学附属第一医院,江苏省血液研究所,苏州大学附属第一医院,江苏省血液研究所,苏州大学附属第一医院,江苏省血液研究所江苏苏州,江苏南通,江苏苏州,江苏苏州,江苏苏州,江苏苏州,江苏苏州,江苏苏州

来源：

中国病理生理杂志 | 2004年 / 01期

关键词：

血栓形成; 血小板; von Willebrand因子;

D O I：

暂无

中图分类号：

R363 [病理生理学];

学科分类号：

摘要：

目的 :进一步研究血栓形成的机制 ,开发抗血栓药物。方法 :应用基因重组技术在大肠杆菌中表达人vWF -A1区蛋白 ,经过纯化、复性 ,获得重组蛋白 (rvWF -A1) ,同时用流式细胞术检测rvWF -A1与血小板膜糖蛋白血小板膜糖蛋白 (glycoprotein ,GP)Ib的结合能力 ,应用血小板聚集仪测定rvWF -A1对瑞斯托霉素 (ristocetin)诱导的血小板聚集抑制作用。结果 :重组表达载体pQE -3 1-vWF -A1在大肠杆菌M15中得到高效表达 ,表达的重组蛋白量占菌体总蛋白的 3 0 % ,Ni -NTAagrose柱纯化后 ,其纯度为 95% ,经复性的rvWF -A1蛋白具有良好的生物学活性。它可与血小板模糖蛋白血小板膜糖蛋白GPIb结合 ,阳性率为 78 6% ;它可以抑制ristocetin诱导的血小板聚集 ,抑制率为 84 7%。结论 :在原核细胞中可以成功地高效表达人vWF -A1区蛋白 ,该重组蛋白有可能开发为有效的抗血栓药物

引用

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