苹果着色期实时定量PCR内参基因的筛选和验证

被引:20
作者
樊连梅 [1 ,2 ]
王超 [1 ]
刘更森 [2 ]
原永兵 [2 ]
机构
[1] 青岛农业大学生命科学学院/山东省高校植物生物技术重点实验室
[2] 青岛农业大学园艺学院/青岛市现代农业质量与安全工程重点实验室
关键词
‘富士’苹果; 内参基因; 实时荧光定量PCR; geNorm程序; NormFinder程序;
D O I
10.13592/j.cnki.ppj.2014.0375
中图分类号
S661.1 [苹果];
学科分类号
摘要
苹果果实着色期基因表达水平的变化对果实品质形成具有重要影响,选择适合的内参基因是提高实时荧光定量PCR分析准确性的首要条件。本试验以‘富士’苹果着色过程中不同取样时间的果皮为材料,通过q RT-PCR分析了常用候选持家基因β-actin、EF-1α、GAPDH和18S r RNA的表达变化,借助ge Norm和Norm Finder程序筛选出在果实着色期q RT-PCR分析的理想内参基因。结果表明,EF-1α的表达水平高且最稳定,其次是18S r RNA,而β-actin和GAPDH的相对表达水平较低;同时,用筛选的内参基因EF-1α和18S r RNA分析苹果花青苷合成途径的二氢黄酮醇-4-还原酶基因的表达水平,其表达规律比较一致,均呈现正态分布。因此,EF-1α和18S r RNA是研究苹果着色期表达的理想的内参基因。
引用
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页码:1903 / 1911
页数:9
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