重组人骨形成蛋白-2成熟肽在大肠杆菌中的高效表达

被引：18

作者：

蒲勤

陈苏民

陈南春

机构：

[1] 第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室

来源：

第四军医大学学报 | 1998年 / 01期

关键词：

人骨形成蛋白,DNA重组,基因表达;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78, [];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

目的：利用大肠杆菌系统高效表达人骨形成蛋白２成熟肽．方法：将编码人骨形成蛋白２成熟肽的基因片段克隆到大肠杆菌表达载体ｐＤＨ上，使其受控于ＰＲＰＬ启动子，构建成表达质粒ｐＤＨＢ２ｍ，以大肠杆菌ＤＨ５α为宿主菌．对工程菌进行温度诱导表达，表达产物初步纯化后进行复性处理，用小鼠肌袋模型检测产物诱骨活性．结果：经４２℃５ｈ诱导，工程菌在ＳＤＳＰＡＧＥ上出现一条新蛋白带，分子质量与预期的一致约为１３ｋｕ，表达量占菌体总蛋白的４５％６０％，主要以包涵体形式存在．所得包涵体经过简单的纯化和复性处理，得到纯度高于８０％的有良好诱骨活性的人骨形成蛋白２成熟肽．结论：人骨形成蛋白成熟肽在大肠杆菌中得到高效表达．

引用

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共 6 条

[1] 一种双顺反子表达载体的构建及应用的研究 [J].