基于TaqMan探针三重荧光PCR检测沙门菌、肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌

被引：10

作者：

袁慕云 ^{[1
]}

刘二龙 ^{[2
]}

谢力 ^{[1
]}

柯碧霞 ^{[3
]}

曹际娟 ^{[4
]}

许龙岩 ^{[1
]}

机构：

[1] 广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心

[2] 黄埔出入境检验检疫局

[3] 广东省疾病预防控制中心

[4] 辽宁出入境检验检疫局

来源：

中国预防医学杂志 | 2015年 / 16卷 / 10期

关键词：

三重荧光PCR; TaqMan探针; 沙门菌; 肠炎沙门菌; 鼠伤寒沙门菌;

D O I：

10.16506/j.1009-6639.2015.10.011

中图分类号：

R440 [];

学科分类号：

摘要：

目的建立基于TaqMan探针三重荧光PCR检测沙门菌(salmonella,Sa)、肠炎沙门菌(salmonella enteritidis,SE)和鼠伤寒沙门菌(salmonella typhimurium,ST)的方法。方法根据沙门菌aceA基因、肠炎沙门菌特异序列(GenBank:AF370707.1)、鼠伤寒沙门菌的STM4599序列(GenBank:AERV01000023.1),分别设计引物和TaqMan探针,在探针的5′端分别标记FAM、VIC、cy5,建立基于TaqMan探针三重实时荧光PCR检测沙门菌的方法。结果 29种不同血清型沙门菌均扩增出aceA基因,肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌的引物和探针分别特异性地扩增出15株肠炎沙门菌和11株鼠伤寒沙门菌,而其他血清型沙门菌和17株非沙门菌扩增结果阴性。aceA、肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌的三重荧光PCR扩增效率分别为89%、87%、90%,最低检测浓度分别达到280cfu/ml、260cfu/ml、300cfu/ml。结论本研究建立的方法特异性好、灵敏度高,可用于食品中沙门菌、肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌的特异性检测。

引用

页码：774 / 780

页数：7

共 13 条

[1] 基于TaqMan探针三重荧光PCR检测MRSA
袁慕云
张旺
卓锦雪
谢力
陈碧玲
许龙岩
[J]. 中国卫生检验杂志, 2014, 24 (02) : 239 - 241+252
[2] TaqMan探针双重荧光PCR法检测副溶血性弧菌
许龙岩
袁慕云
曹际娟
凌莉
[J]. 食品科学, 2013, 34 (18) : 263 - 266
[3] 基于TaqMan探针双重荧光PCR检测食品中鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌[J]. 袁慕云,许龙岩,曹际娟,阳静,张旺,陈碧玲,相大鹏. 卫生研究. 2013(03)
[4] TaqManTM实时荧光PCR快速检测沙门氏菌的初步研究
陈贤林
滕毅
杨纯
李义
汤洪萍
张朝云
[J]. 现代预防医学, 2011, 38 (23) : 4927 - 4929
[5] 添加有扩增内标的沙门氏菌荧光定量PCR检测体系的建立与评价
但现龙
刘斌
李小玲
张利达
施春雷
周敏
史贤明
[J]. 微生物学报, 2011, 51 (08) : 1119 - 1127
[6] 双重荧光定量PCR检测沙门菌和单核细胞增生李斯特菌方法的建立
王振东
吉尚志
杨宇
王静
[J]. 中国食品卫生杂志, 2011, 23 (04) : 289 - 292
[7] 肠炎沙门菌种特异性PCR及对感染鸭快速检测
邓树轩
程安春
汪铭书
曹平
朱德康
陈孝跃
[J]. 中国兽医学报, 2009, (02) : 153 - 157
[8] Gastrointestinal tract distribution of Salmonella enteritidis in orally in fected mice with a species-specific fluorescent quantitative polymerase chain reaction[J]. Shu-Xuan Deng, An-Chun Cheng, Ming-Shu Wang, Ping Cao Research Center of Poultry Diseases, College of Animal Science and Veterinary Medicine, Sichuan Agricultural University, Yaan 625014, Sichuan Province, China Research Center of Poultry Diseases, College of Animal Science and Veterinary Medicine, Sichuan Agricultural University;Ke
[9] 三种菌的三重实时荧光PCR检测引物、探针、检测试剂盒和检测方法[P]. 许龙岩,袁慕云,曹际娟,柯碧霞,相大鹏,邹志飞,谢力. 中国专利:CN102747144A, 2012-10-24
[10] GB 4789.4-2010. 食品安全国家标准　食品微生物学检验　沙门氏菌检验[S]. 2010

← 1 2 →