龙胆苦苷对脂多糖诱导血管内皮细胞损伤的作用及机制

目的研究龙胆苦苷对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导血管内皮细胞损伤的作用及机制。方法以LPS刺激大鼠主动脉血管内皮细胞RAEC,并给予低、中、高剂量(5、10、20μmol/L)龙胆苦苷进行干预,采用CCK-8法检测细胞增殖情况;采用流式细胞术检测细胞凋亡情况;采用试剂盒检测细胞丙二醛水平和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;采用qRT-PCR法检测细胞中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-1βmRNA表达情况;采用Western blotting方法检测细胞中磷酸化p65(p-p65)和剪切型半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白表达情况。RAEC细胞给予核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号激活剂处理,考察NF-κB信号激活剂对龙胆苦苷改善RAEC细胞损伤的影响。结果与对照组比较,模型组细胞活性显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05),丙二醛水平显著升高(P<0.05),SOD活性显著降低(P<0.05),TNF-α、IL-6和IL-1βm RNA表达水平显著升高(P<0.05),cleavedCaspase-3和p-p65蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与模型组比较,龙胆苦苷组细胞活性显著升高(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.05),丙二醛水平显著降低(P<0.05),SOD活性显著升高(P<0.05),TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA表达水平显著降低(P<0.05),cleaved Caspase-3和p-p65蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。NF-κB信号激活剂显著抑制龙胆苦苷改善RAEC细胞损伤的作用(P<0.05)。结论龙胆苦苷能够抑制LPS诱导的RAEC细胞凋亡、氧化损伤和炎性因子表达,其作用机制可能与抑制NF-κB信号通路有关。