人ACE2基因真核表达载体的构建及其转染人内皮细胞的研究

被引：5

作者：

钟久昌

余细勇

于汇民

林秋雄

周志凌

杨敏

机构：

[1] 广东省人民医院医学研究中心

来源：

心血管康复医学杂志 | 2007年 / 04期

基金：

广东省自然科学基金; 中国博士后科学基金;

关键词：

肽基二肽酶A; 基因; 质粒; 高血压;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

目的:克隆人血管紧张素转换酶2(ACE2)基因,构建其真核表达载体并将之转染入体外培养的人血管内皮细胞中。方法:采用PCR方法从人胎儿心脏cDNA文库扩增出人ACE2cDNA全长基因,克隆到pcDNA3.1-D/V5-His表达载体上,构建重组真核表达质粒phACE2,经酶切和测序鉴定。采用脂质体法将phACE2转染至人血管内皮细胞中,分别利用实时定量PCR和Western印迹检测重组ACE2的mRNA和蛋白的表达情况。结果:经PCR、酶切和基因序列测定证实重组入载体的片段(2419bp)为目的基因序列,在转染的内皮细胞中发现ACE2的mRNA和蛋白的表达明显增加(P<0.01)。结论:本研究成功构建并表达了pcDNA3.1-hACE2重组真核表达载体,为该基因在高血压病防治中的功效研究奠定了基础。

引用

页码：325 / 328+330 +330

页数：5

共 6 条

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